Question 1

Как рассчитать КОЕ/мл при серийном разведении?

Accepted Answer

КОЕ/мл = число колоний / (степень разведения × объём посева в мл). Например, 150 колоний при разведении 10⁻⁶ и посевном объёме 0.1 мл: 150 / (10⁻⁶ × 0.1) = 1.5 × 10⁹ КОЕ/мл. Достоверен результат при 30–300 колоний на чашке. При превышении — пересеять с большим разведением, при недостатке — с меньшим.

Question 2

Что такое время генерации и как его определить?

Accepted Answer

Время генерации (время удвоения, g) — время, за которое численность бактерий удваивается. Рассчитывается по формуле g = t · ln(2) / ln(N/N₀), где t — время в минутах, N₀ и N — начальная и конечная численность. Для E. coli при 37°C g ≈ 20 мин, для M. tuberculosis — 12–24 часа. Знание g критично для планирования ферментации и временных расчётов в лаборатории.

Question 3

Как перевести OD600 в концентрацию клеток?

Accepted Answer

Оптическая плотность OD₆₀₀ линейно коррелирует с концентрацией клеток в пределах 0.1–0.8 для E. coli. Приблизительный коэффициент: 1 единица OD₆₀₀ ≈ 8 × 10⁸ клеток/мл для E. coli. Коэффициент зависит от вида, штамма, среды и конструкции спектрофотометра. При OD > 1 разведите культуру 1:10 и умножьте результат на 10 для точности.

Question 4

Что означает МИК и как интерпретировать результат S/I/R?

Accepted Answer

МИК (минимальная ингибирующая концентрация) — наименьшая концентрация антибиотика, подавляющая видимый рост микроорганизма. По EUCAST: S (чувствительный) — лечение стандартными дозами эффективно; I (промежуточный) — требуются максимальные дозы или местное применение; R (резистентный) — стандартные режимы неэффективны. МИК определяют методом серийных разведений в бульоне или E-тестом.

Question 5

Для чего нужен стандарт Макфарланда 0.5?

Accepted Answer

Стандарт Макфарланда 0.5 соответствует ≈ 1–2 × 10⁸ КОЕ/мл и используется для приготовления стандартного инокулюма при тестировании антибиотикочувствительности дисково-диффузным методом и при определении МИК. Это требование EUCAST и CLSI. Суспензию готовят путём разведения свежей 18–24-часовой культуры в 0.9% NaCl до мутности, соответствующей стандарту, и используют в течение 15–30 минут.

Question 6

Что такое фазы роста бактерий?

Accepted Answer

Кривая роста бактериальной культуры включает 4 фазы: 1) Лаг-фаза — адаптация к среде, синтез ферментов, роста нет; 2) Логарифмическая (экспоненциальная) фаза — быстрое удвоение, N = N₀ · 2^(t/g), клетки наиболее физиологически активны; 3) Стационарная фаза — скорость роста = скорость гибели, N = const из-за истощения питательных веществ; 4) Фаза гибели — преобладает лизис клеток. Для биотехнологических процессов клетки берут на логарифмической фазе.

Question 7

Чем отличается метод дисково-диффузии от МИК в бульоне?

Accepted Answer

Диско-диффузный метод (Кирби-Бауэра): антибиотик диффундирует из диска в агар, создавая концентрационный градиент; размер зоны ингибирования интерпретируется по EUCAST/CLSI таблицам. МИК в бульоне: прямое определение минимальной ингибирующей концентрации путём роста в серийных разведениях. МИК точнее, но трудоёмче. Дисково-диффузный метод доступнее для рутинных исследований. Оба метода регламентированы ГОСТ Р 58443-2019.

Question 8

Как рассчитать удельную скорость роста μ?

Accepted Answer

Удельная скорость роста μ (мин⁻¹ или ч⁻¹) — показатель интенсивности роста. Рассчитывается двумя способами: 1) через время генерации: μ = ln(2) / g; 2) через динамику численности: μ = ln(N/N₀) / t. Связь: N(t) = N₀ · e^(μt). Для E. coli при g = 20 мин: μ = 0.693 / 20 ≈ 0.0347 мин⁻¹ = 2.08 ч⁻¹. Используется в математических моделях ферментации и уравнении Моно.

Question 9

Что такое EUCAST и CLSI?

Accepted Answer

EUCAST (Европейский комитет по тестированию антимикробной чувствительности) — европейская система критериев интерпретации МИК и зон ингибирования. CLSI (Институт клинических и лабораторных стандартов) — американская система. В России рекомендуется применение EUCAST (ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010). Критерии обновляются ежегодно. EUCAST и CLSI различаются значениями пограничных концентраций для ряда антибиотик-микроорганизм комбинаций.

Question 10

Как правильно сделать серийное 10-кратное разведение?

Accepted Answer

Протокол 10-кратных разведений: 1) Добавить 0.1 мл исходной культуры в 0.9 мл стерильного физраствора (разведение 10⁻¹); 2) Взять 0.1 мл из 10⁻¹ в следующую пробирку (10⁻²); 3) Повторить до нужной степени разведения; 4) Высеять 0.1 мл нужных разведений на питательный агар; 5) Инкубация 24–48 ч; 6) Подсчёт колоний на чашках с 30–300 КОЕ; 7) Расчёт: КОЕ/мл = N / (D × V). Используйте свежие стерильные наконечники для каждого разведения.

Калькулятор микробиологии

Калькулятор микробиологии

Основы количественной микробиологии

📈Кривая роста бактерий

🧫Метод КОЕ (посев на агар)

💊МИК и антибиотикочувствительность

⚗️Стандарты Макфарланда

Микробиология в медицине и биотехнологии России

Клиническая микробиология

Биотехнология и ферментация

Практические советы микробиолога

Точность посева

Работа со спектрофотометром

Интерпретация МИК

Как использовать калькулятор микробиологии

Выберите инструмент

Введите данные

Нажмите "Рассчитать"

Интерпретируйте и используйте

Часто задаваемые вопросы

Лиана Арифметова

Инструмент справочный — не заменяет эксперта

Похожие калькуляторы

Калькулятор патофизиологии

Калькулятор микологии

Калькулятор иммунологии

Калькулятор фармакологии

Калькулятор эпидемиологии

Калькулятор паразитологии

Калькулятор физиологии растений

Калькулятор генетики

Калькулятор физиологии

Калькулятор эмбриологии

Калькулятор токсикологии

Калькулятор гистологии

Калькулятор вирусологии

Калькулятор нейронауки

Калькулятор биоинформатики

Калькулятор микробиологии